Spektrometria mas - kolos

 0    35 schede    mikimiki19999
Scarica mp3 Stampa Gioca Testa il tuo livello
 
Domanda język polski Risposta język polski
Parametry analizatorów mas
inizia ad imparare
Zakres mas, szybkość analizy, tryb przepuszczania jonów (przemiatające i jednoczesne), tryb pracy (ciągły i impulsowy)
Dokładność mas
inizia ad imparare
różnica pomiędzy obserwowaną a przewidywana masą
maleje wraz ze wzrostem m/z jonu
Rozdzielczość
inizia ad imparare
zdolność do rozróżnienia sygnałów o bliskich wartościach m/z
Typy analizatorów mas
inizia ad imparare
analizator kwadrupolowy, liniowa pułapka jonowa, kwadrupolowa pułapka jonowa, orbitrap, analizator czasu przelotu
Tryby MS
inizia ad imparare
SCAN oraz SIM
SCAN - tryb przemiatania pełnego widma, Sim -tryb monitorowania wybranych jonów
Pułapka jonowa
inizia ad imparare
Zbudowana z 2 elektrod sferycznych oraz elektrody kołowej. Kierujemy tutaj polem występującym wewnątrz.
Tworzymy takie pole w kształcie siodła i zmieniamy jej położenie co powoduje że tylko niektóre jony zostaną przepuszczone. Im jony mają wieksze m/z tym mniej się poruszają się w pułapce jonowej. Jony można gromadzić i przechowywać w pułapce jonowej.
Separacja jonów w pułapce jonowej polega na...
inizia ad imparare
Selektywna destabilizacja jonów oraz Wyrzut rezonansowy
Selektywna destabilizacja jonów - przy zmianie V, powoli coraz bardziej destabilizuje nam się jon, Wyrzut rezonansowy selektywnie izoluje jon poprzez wyrzucenie innych m/z za pomoca wzbudzenia rezonsowego
Etapy eksperymentu w pułapce jonowej
inizia ad imparare
0) Wstępny skan 1) Wprowadzenie jonów 2) Izolacja jonu/jonów 3) Chłodzenie wzbudzanie, reakcje jonu/jonów 4) Analiza masy jonu/jonów
"Analizator czasu przelotu
inizia ad imparare
Czas przelotu jest proporcjonalny do masy, - Reflektron (zwierciadło jonowe) koryguje energię kinetyczną jonów, czyli skupia w czasie jony o rożnych energiach kinetycznych podnosząc rozdzielczość pomiaru m/z
, Dłuższa droga przelotu jonów pozwala też na lepsze rozdzielenie zbliżonych wartości m/z"
Orbitrap
inizia ad imparare
(nie działa nigdy samodzielnie) jony o tym samym m/z oscylują synchronicznie wzdłuż osi z - pozostają zgodne w fazie przez setki tysięcy oscylacji
Etapy analizy jonów przez Orbitrap
inizia ad imparare
1) Przygotowanie paczki jonów 2) Wprowadzenie jonów do orbitrapu 3) Osiowy ruch jonów oraz ich detekcja
Analizator ruchliwości jonów
inizia ad imparare
może pracować pod ciśnieniem atmosferycznym, Pomiar ruchliwości zjonizowanych cząsteczce w gazie buforowym pod wpływem pola elektrycznego
Naładowane cząsteczki dzięki obecności pola elektrycznego, przemieszczają się w przestrzeni wypełnionej neutralnym gazem i są rozdzielane na skutek zderzeń z jego cząsteczkami
Ruchliwość jonu zależy od:
inizia ad imparare
ładunku, masy rozmiaru, kształtu (konformacji), masy i gęstości gazu w analizatorze, temperatury i ciśnienia w analizatorze
Tandemowe i hybrydowe spektrometrie mas mogą działać na zasadzie
inizia ad imparare
fragmentacji rozdzielonej w przestrzeni oraz fragmentacji rozdzielonej w czasie
Aktywacja i dysocjacja jonów
inizia ad imparare
fragmentacja indukowana kolizyjnie, fragmentacja indukowana na powierzchni, dysocjacja spowodowana absorpcją promieniowania elektromagnetycznego, dysocjacja spowodowana wychwytem elektronu
E. wew. cząsteczki możemy podzielić na
inizia ad imparare
spinową jąder, translacyjną rotacyjną oscylacyjną i elektronową
Teoria quasi-równowagowa opiera się na 4 założeniach:
inizia ad imparare
Czas dysocjacji jonów jest długi, Dysocjacja jest powolna w stosunku do szybkości redystrybucji energii wzbudzenia, Energia jest rozprowadzana z równym prawdopodobieństwem pomiędzy wszystkie stopnie swobody,
Produkty dysocjacji są wynikiem szeregu konkurencyjnych procesów dysocjacji oraz reakcji następczych
Fragmentacja indukowana kolizyjnie (CID)
inizia ad imparare
zderzenie między jonem a celem, jednoczasteczkowy rozkład wzbudzonego jonu
Kolizje możemy podzielić na:
inizia ad imparare
wysokoenergetyczne przy użyciu np. helu to otrzymujemy prostsze widma i bardziej wyraźne fragmentacje oraz niskoenergetyczne np. azot to otrzymujemy widma o bardziej zróżnicowanych ścieżkach fragmentacji
Energia fragmentacji jonu
inizia ad imparare
jeśli otrzymana energia jest wyższa niż energia wiązania obecnego w jonie to zachodzi rozpad tego wiązania i na widmie obserwuje się sygnał pochodzący od odpowiedniego jonu
im wyższa energia przekazana cząstce tym więcej fragmentacji stosunek intensywności sygnałów pochodzących od jonów fragmentacyjnych zależy od rozkładu energii w jonie macierzystym bezpośrednio przed zderzeniami
jon macierzysty
inizia ad imparare
ten jon który fragmentujemy
jon pseudocząsteczkowy
inizia ad imparare
jeśli damy go do fragmentacji to może być on jonem macierzystym
jon potomny
inizia ad imparare
jon który powstał po fragmentacji
fragment obojętny
inizia ad imparare
niewidzoczny na widmie mas
jon fragmentacyjny
inizia ad imparare
jon którego nie wiemy z czego powstał
Tryby MS/MS
inizia ad imparare
product ion, precursor ion, neutral loss, MRM
Przemiatanie jonów potomnych (SIM, CID, SCAN)
inizia ad imparare
pozwala otrzymać produkty fragmentacji jonu macierzystego. Stosowany w celu identyfikacji związków i tworzenia bibliotek widm
Wraz ze wzrostem energii kolizji
inizia ad imparare
maleje masa jonów fragmentacyjnych, naastępuje zmiana stosunków intensywności sygnałów i/lub zwiększa się ilość jonów fragmentacyjnych
Przemiatanie jonów macierzystych (SCAN, CID, SIM)
inizia ad imparare
służy do poszukiwania grup związków które w wyniku framentyzacji dają charakterystyczny jon potomny
Monitorowanie utraty fragmentów obojętnych (SCAN, CID, SCAN)
inizia ad imparare
służy do poszukiwania związków które tracą cząsteczke obojętną
Monitorowanie wybranych reakcji fragmentacji (MRM) (SIM, CID, SIM)
inizia ad imparare
duża intensywność sygnału oraz niska wartość sumu. stosowany w analizie ilościowej
DDA (data dependent acquisition)
inizia ad imparare
celem jest zidentyfikowanie jak największej liczby peptydów, pojedyńczo. w 1 skanie uzyskujemy widmo mas próbki i najbardziej intensywne przenosimy do 2 etapu gdzie przy 2 skanie badamy b. wąskie pasmo m/z
DIA (data independent acquisition
inizia ad imparare
celem jest ciągłe monitorowanie intesywności jonów fragmentacyjnych dla wszystkich eluujących peptydów. Różni się od DDA tym że wszystkie jony są transportowane do 2 etapu ale w danym wąskim zakresie m/z
Widma MS związków możemy dzielić z punktu widzenia
inizia ad imparare
techniki jonizacyjnej, rozdzielczości, metody pomiaru
Reguła azotu
inizia ad imparare
jeśli związek ma parzystą mase to ma 0 lub parzystą l.at. azotu

Devi essere accedere per pubblicare un commento.